رنگ آمیزی بافت های گیاهی

تئوری آزمایش :

رنگ آمیزی بافت های گیاهی به دو منظور انجام می شود

پدیدار ساختن قسمت هایی که در حالت عادی شفاف و نامرئی هستند

مشخص کردن یک جز از اجزای دیگر

مواد رنگی هم در واقع شامل ترکیباتی هستند که درون اجزای مقطع و سلول ها نفوذ می کنند و چون انواعی از آنها از لحاظ شیمیایی نیز واکنش هایی با اجزای سلول ها و مقاطع انجام می دهند ، تاثیری دائمی بر مقاطع می گذراند .

برای رنگ آمیزی بافت های قبل از مقطع گیری اندام مورد مطالعه را در محلول های ثابت کننده بیندازید . این محلول ها سلول های زنده را می کشد در نتیجه قابلیت نفوذپذیری دیواره سلولی در برابر رنگ ها افزایش می یابد و در عین حال مواد ثابت کننده باعث می شوند که اجزای سلولی به همان شکل ساختمانی که در حالت زنده داشته باقی بمانند . یکی از ثابت کننده های مهم الکل است . اندام مورد نظر را به مدت ۲۴ ساعت در الکل اتیلیک یا الکل متیلیک قرار دهید که در این صورت الکل آب اندام ها را گرفته و آنها را برای مقطع گیری آماده می کند .

رنگ آمیزی ساده :

مواد و وسایل لازم :

دو عدد شیشه ساعت

یک عدد تیغ برای مقطع گیری

آب مقطر

بلودومتیلن ، سبزید یا فوشین آمونیاکی

روش کار :

برای رنگ آمیزی با بلودومتیلن مقاطع را به مدت نیم تا یک دقیقه در شیشه ساعتی که حاوی محلول یک در هزار بلودومتیلن است می گذاریم و بعد مقطع را در شیشه ساعتی که حاوی آب است جهت شست و شو قرار می دهیم .

برای رنگ آمیزی با سبزید مقاطع را به مدت یک دقیقه در شیشه ساعتی که حاوی محلول سبزید به غلظت نیم درصد است می گذاریم و بعد مقطع را در شیشه ساعتی که حاوی آب است جهت شست و شو قرار می دهیم .

برای رنگ آمیزی با فوشین آمونیاکی مقاطع را به مدت چند ثانیه در شیشه ساعتی که حاوی فوشین آمونیاکی است می گذاریم و بعد مقطع را در شیشه ساعتی که حاوی آب است جهت شست و شو قرار می دهیم .

نتیجه آزمایش :

1-بلودومتیلن چوب ، چوب پنبه و کوتین را آبی رنگ می کند و بر دیواره های سلولزی سلول ها اثر ندارد .

2-سبزید بافت های چوب ، چوب پنبه و کوتین را به رنگ سبز متمایل به آبی در می آورد .

3-فوشین آمونیاکی بافت های چوب ، چوب پنبه و کوتین را به رنگ قرمز در می آورد .

رنگ آمیزی مضاعف :

مواد و وسایل لازم :

نه عدد شیشه ساعت

یک عدد تیغ برای مقطع گیری

آب مقطر

آب ژاول

اسید استیک

بلودومتیلن ، سبزید یا فوشین آمونیاکی (برای تشخیص بافت های چوبی و چوب پنبه ای)

کارمن زاجی (برای تشخیص بافت های سلولزی)

روش کار :

در این نوع رنگ آمیزی دو دسته اصلی بافتها (بافت های چوبی و سلولزی) از هم متمایز می شوند که برای این کار از دو رنگ استفاده می شود که یکی سلولز و دیگری چوب ، چوب پنبه و کوتین را رنگ آمیزی می کند .

مراحل رنگ آمیزی مضاعف به شکل زیر است :

1-قرار دادن مقاطع میکروسکوپی در آب ژاول به منظور خالی کردن محتویات سلول به مدت 15- 20 دقیقه

2-شستن مقاطع با آب مقطر

 3-قرار دادن مقاطع در اسید استیک (یک درصد) به منظور خنثی کردن اثر آب ژاول به مدت 1- 2 دقیقه

4-شستن مقاطع با آب مقطر

5-قرار دادن مقاطع در محلول سبزید یا بلودومتیلن به مدت 1- 2 دقیقه

6-شستن مقاطع با آب مقطر

7-قرار دادن مقاطع در محلول کارمن زاج دار به مدت 20 دقیقه

8-شستن مقاطع با آب مقطر

نتیجه آزمایش :

1-سلول های دارای دیواره سلولزی مانند پارانشیم ، کلانشیم ، آوندهای آبکشی و فیبر سلولزی به وسیله کارمن زاج دار قرمز متمایل به نارنجی می شوند .

2-بافت های بافت های چوبی ، چوب پنبه ای و کوتینی توسط سبزید یا بلودومتیلن به سبز یا آبی متمایل به سبز در می آیند .