رنگ آمیزی
رنگ آمیزی بافت های گیاهی
تئوری آزمایش :
رنگ آمیزی بافت های گیاهی به دو منظور انجام می شود
|
پدیدار ساختن قسمت هایی که در حالت عادی شفاف و نامرئی هستند |
|
مشخص کردن یک جز از اجزای دیگر |
مواد رنگی هم در واقع شامل ترکیباتی هستند که درون اجزای مقطع و سلول ها نفوذ می کنند و چون انواعی از آنها از لحاظ شیمیایی نیز واکنش هایی با اجزای سلول ها و مقاطع انجام می دهند ، تاثیری دائمی بر مقاطع می گذراند .
برای رنگ آمیزی بافت های قبل از مقطع گیری اندام مورد مطالعه را در محلول های ثابت کننده بیندازید . این محلول ها سلول های زنده را می کشد در نتیجه قابلیت نفوذپذیری دیواره سلولی در برابر رنگ ها افزایش می یابد و در عین حال مواد ثابت کننده باعث می شوند که اجزای سلولی به همان شکل ساختمانی که در حالت زنده داشته باقی بمانند . یکی از ثابت کننده های مهم الکل است . اندام مورد نظر را به مدت ۲۴ ساعت در الکل اتیلیک یا الکل متیلیک قرار دهید که در این صورت الکل آب اندام ها را گرفته و آنها را برای مقطع گیری آماده می کند .
رنگ آمیزی ساده :
مواد و وسایل لازم :
|
دو عدد شیشه ساعت |
|
یک عدد تیغ برای مقطع گیری |
|
آب مقطر |
|
بلودومتیلن ، سبزید یا فوشین آمونیاکی |
روش کار :
برای رنگ آمیزی با بلودومتیلن مقاطع را به مدت نیم تا یک دقیقه در شیشه ساعتی که حاوی محلول یک در هزار بلودومتیلن است می گذاریم و بعد مقطع را در شیشه ساعتی که حاوی آب است جهت شست و شو قرار می دهیم .
برای رنگ آمیزی با سبزید مقاطع را به مدت یک دقیقه در شیشه ساعتی که حاوی محلول سبزید به غلظت نیم درصد است می گذاریم و بعد مقطع را در شیشه ساعتی که حاوی آب است جهت شست و شو قرار می دهیم .
برای رنگ آمیزی با فوشین آمونیاکی مقاطع را به مدت چند ثانیه در شیشه ساعتی که حاوی فوشین آمونیاکی است می گذاریم و بعد مقطع را در شیشه ساعتی که حاوی آب است جهت شست و شو قرار می دهیم .
نتیجه آزمایش :
|
1-بلودومتیلن چوب ، چوب پنبه و کوتین را آبی رنگ می کند و بر دیواره های سلولزی سلول ها اثر ندارد . |
|
2-سبزید بافت های چوب ، چوب پنبه و کوتین را به رنگ سبز متمایل به آبی در می آورد . |
|
3-فوشین آمونیاکی بافت های چوب ، چوب پنبه و کوتین را به رنگ قرمز در می آورد . |
رنگ آمیزی مضاعف :
مواد و وسایل لازم :
|
نه عدد شیشه ساعت |
|
یک عدد تیغ برای مقطع گیری |
|
آب مقطر |
|
آب ژاول |
|
اسید استیک |
|
بلودومتیلن ، سبزید یا فوشین آمونیاکی (برای تشخیص بافت های چوبی و چوب پنبه ای) |
|
کارمن زاجی (برای تشخیص بافت های سلولزی) |
روش کار :
در این نوع رنگ آمیزی دو دسته اصلی بافتها (بافت های چوبی و سلولزی) از هم متمایز می شوند که برای این کار از دو رنگ استفاده می شود که یکی سلولز و دیگری چوب ، چوب پنبه و کوتین را رنگ آمیزی می کند .
مراحل رنگ آمیزی مضاعف به شکل زیر است :
|
1-قرار دادن مقاطع میکروسکوپی در آب ژاول به منظور خالی کردن محتویات سلول به مدت 15- 20 دقیقه |
|
2-شستن مقاطع با آب مقطر |
|
3-قرار دادن مقاطع در اسید استیک (یک درصد) به منظور خنثی کردن اثر آب ژاول به مدت 1- 2 دقیقه |
|
4-شستن مقاطع با آب مقطر |
|
5-قرار دادن مقاطع در محلول سبزید یا بلودومتیلن به مدت 1- 2 دقیقه |
|
6-شستن مقاطع با آب مقطر |
|
7-قرار دادن مقاطع در محلول کارمن زاج دار به مدت 20 دقیقه |
|
8-شستن مقاطع با آب مقطر |
نتیجه آزمایش :
|
1-سلول های دارای دیواره سلولزی مانند پارانشیم ، کلانشیم ، آوندهای آبکشی و فیبر سلولزی به وسیله کارمن زاج دار قرمز متمایل به نارنجی می شوند . |
|
2-بافت های بافت های چوبی ، چوب پنبه ای و کوتینی توسط سبزید یا بلودومتیلن به سبز یا آبی متمایل به سبز در می آیند . |